培養(yǎng)皿規(guī)格尺寸的計(jì)算,在國(guó)際上有兩種不同的計(jì)算方法:一種方法是按皿蓋計(jì)算,理由是在培養(yǎng)時(shí)使用恒溫箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng),它可以計(jì)算恒溫箱的體積可存放多少個(gè)培養(yǎng)皿;另一種計(jì)算方法是按照培養(yǎng)皿皿底計(jì)算,理由是在培養(yǎng)時(shí)可按照培養(yǎng)皿的皿底體積計(jì)算使用多少培養(yǎng)基。
使用前經(jīng)過(guò)清潔消毒,培養(yǎng)皿清潔與否對(duì)工作影響較大,可影響培養(yǎng)基的酸堿度,若有某些化學(xué)藥品的存在,會(huì)抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。新購(gòu)的培養(yǎng)皿應(yīng)先用熱水沖洗,再置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 1 %或 2 %的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時(shí),使游離堿性物質(zhì)除去,再用蒸餾沖洗 2 次。若要培養(yǎng)細(xì)菌,再用高壓蒸氣 (一 般 6. 8 × 105Pa 高壓蒸氣),120℃ 的溫下30min滅菌,置室溫中干燥,或用干熱滅菌,就是將培養(yǎng)皿置于烘箱內(nèi),溫度控制在 120℃左右的情況下維持 2h,即可殺死細(xì)菌的胞芽。經(jīng)過(guò)消毒的培養(yǎng)皿才能接種培養(yǎng)使用。
培養(yǎng)皿通常使用固體培養(yǎng)基制成平板培養(yǎng) (就是平板皿名稱的由來(lái)),平板培養(yǎng)基制作是將已裝好的滅菌瓊脂培養(yǎng)基,用溫水 (無(wú)菌)溶化,取下試管的棉花塞,管口子酒精燈火焰上通過(guò),然后微啟滅菌的培養(yǎng)皿蓋,使試管口能深入為宜,傾入培養(yǎng)基后即可蓋密,再輕輕地?fù)u勻傾入的培養(yǎng)基,使之均勻地分布于皿底上凝結(jié),即得平板培養(yǎng)基。由于細(xì)菌的繁殖、發(fā)育生長(zhǎng)是與所供給的培養(yǎng)基 (營(yíng)養(yǎng))有直接關(guān)系,尤其是作定量檢驗(yàn)分析,對(duì)提供營(yíng)養(yǎng)物的多少,有決定意義。
細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物提供的多少、是否均勻,培養(yǎng)皿皿底是否平整極為重要,如培養(yǎng)皿皿底不平,瓊脂的培養(yǎng)基分布將隨培養(yǎng)皿皿底是否平整而有厚有薄,薄的部分營(yíng)養(yǎng)供給就不足,這對(duì)定量分析有著密切關(guān)系,故對(duì)定量培養(yǎng)皿皿底要求特別平整的原因所在。但作一般定性 (檢驗(yàn)細(xì)菌、菌落生長(zhǎng)、繁殖等),使用普通
培養(yǎng)皿即可。